技術分享

【IBA Lifesciences】如何挑選蛋白純化試劑?

分享於：

【IBA Lifesciences】如何挑選蛋白純化試劑?

Table of Contents

快報

IBA進行了產品更新，此篇文章部分為舊版產品，新版產品文章即將推出~

若想了解更多關於 Strep tag® 的技術原理，可點選此篇文章 【IBA】細胞和蛋白質分離的高性能研究工具 — Strep-tag®

那麼話不多說，進入我們今天的主軸~

還在煩惱蛋白不好純化? 純化出來的蛋白純度總是不高? 產量不多等問題嗎?

還有純化產品種類這麼多? 究竟哪種才是適合我的產品呢?

不用擔心，小編幫您整理了以下表格，讓您可以根據不同的需求，選擇相對應的產品。

IBA提供了不同類型的 Strep-Tactin® & Strep-Tactin®XT resin供選擇

它們的特性和適用性各不相同：

Resin	特性&適用性
Strep-Tactin®XT4Flow®	如果您沒有特殊要求，推薦您可選擇此樹脂！→ 建議首次使用 Strep-tag® 系統的用戶使用Strep-Tactin®XT 4Flow®→ 適用於所有蛋白質類型的全能型產品，尤其是大蛋白質 (>90 kDa)、低表達蛋白質和具挑戰性的蛋白質→ 相較於Strep-Tactin®XT 4Flow® 來說，Strep-Tactin®XT 4Flow® high capacity對於目標蛋白的結合能力高了3-5倍
Strep-Tactin®Sepharose®	如果您想要純化較大的蛋白質，推薦您可選擇此樹脂！→ 適用於難以從 Strep-Tactin®XT resin中洗脫 (elute) 的蛋白質，例如具有多個標籤 (multiple tags) 或多聚體 (multimers) 的蛋白質→ 僅適用於gravity flow chromatography (因不具有壓力穩定性)
Strep-Tactin®Superflow®	適用於難以從 Strep-Tactin®XT 樹脂中洗脫 (elute) 的蛋白質→ 可用於生物素化蛋白質(biotinylated proteins)的純化→ 適合用於一般大小的蛋白質 (<90 kDa)→ 低壓穩定 (FPLC/HPLC/Äkta應用)→ 與 Strep-Tactin® Superflow® 相比，Strep-Tactin® Superflow® high capacity的蛋白質結合能力高3-5倍
MagStrep Beads (Strep-Tactin® XT coated magnetic beads)	用於小規模純化→ 僅用於批量純化→ 優良的Strep-Tactin® XT塗層，可在低背景下實現高效結合→ 靈活的洗脫(Elution)條件 — 在變性條件下通過在SDS gel loading buffer中煮沸，或在原生(native)條件下用生物素洗脫→ 針對批量純化進行優化→ 可以用磁性裝置分離珠子，無需離心→ 適用於 96 孔盤純化

對於初學者及不確定應該選購哪些試劑的人，不用擔心，

IBA推出了Strep-Tactin®XT 4Flow® Starter Kit！

產品優點：

高親和力和蛋白產量，即使對於大蛋白質也表現優異
能夠更有效純化大蛋白質(higher capacity)
廣泛的 pH 穩定性(pH 4-10)
相較於 Strep-Tactin® Sepharose®，壓力穩定性更高
高性價比

Strep-Tactin® XT 4Flow® Starter Kit 內含：

1 ml Strep-Tactin® XT 4Flow® gravity flow column
1 x Buffer W
1 x Buffer BXT
1 x Buffer XT-R
Strep-Tactin® conjugated with HRP for Western Blot detection
Short protocol

高純度、高產量

產品資訊

Cat.	Product Name	Size
2-5998-000	Strep-Tactin®XT 4Flow® Starter Kit	1 kit
2-5151-000	Strep-Tactin®XT 4Flow® high capacity Spin Column Kit	1 kit

產品詳細比較

	Strep-Tactin^®		Strep-Tactin^®XT
Matrix	Superflow^®	Sepharose^®	4Flow^®	MagStrep “type3” XT beads
結合能力/ 動態結合能力*	classic: 3 mg/ml resin*	classic: 3 mg/ml resin*	classic: 5 mg/ml resin**	classic: 25.5 mg/ml resin*
結合能力/ 動態結合能力*	high capacity: 7.0 mg/ml resin**	N/A	high capacity: 14 mg/ml resin**	N/A
珠子結構	6% agarose, crosslinked	4% agarose, crosslinked	4% agarose, highly crosslinked	magnetic core covered with 6% agarose, crosslinked
珠子大小	60-160 µm, spherical	45-165 µm	50-150 µm, spherical	25 μm (average), spherical
分子量排除極限(Exclusion limit)	6 x 10⁶Da	~3 x 10⁷ Da	3 x 10⁷ Da	not specified
推薦流量	0.5-1 ml/min	gravity flow	0.5-1 ml/min	batch purification
蛋白質結合的pH值範圍	7-8	7-8	4-10	6-10
最大壓力	9.6 bar	gravity flow	9.6 bar	batch purification
保存方式	4 °C, do not freeze	4 °C, do not freeze	4 °C, do not freeze	4 °C, do not freeze
洗脫液(Eluent)	desthiobiotin	desthiobiotin	biotin	biotin
再生試劑(Regeneration buffer)	Buffer R	Buffer R	Buffer XT-R	regeneration not recommended
* Max binding capacity for a Strep-tag^® protein (30kDa).** Dynamic binding capacity (DBC) was determined with mCherry-Twin-Strep-tag (30 kDa) under realistic operation conditions and shows the amount of protein which is bound until 10% of the protein is found in the flow through.

純化產品推薦(Magnetic beads)

Specifications	2 ml	10 ml
MagStrep “type3” Strep-Tactin® beads	2-1613-002	N/A
MagStrep “type3” XT beads	2-4090-002	2-4090-010
Features and recommendations	Optimized for Batch purificationBeads can be separated with a magnetic device, no centrifugation is necessarySuitable for purification in 96-well plates

純化產品推薦(Agarose beads)

	0.2 ml gravity flow column (5 columns)	1 ml gravity flow column	5 ml gravity flow column	10 ml gravity flow column	1 ml cartridge	5 ml cartridge	4 ml resin	20 ml resin	50 ml resin
Sepharose®	N/A	2-1202-001	N/A	N/A	N/A	N/A	2-1201-002	2-1201-010	2-1201-025
Superflow® high capacity (HC)	2-1209-550	2-1209-001	2-1209-051	N/A	2-1239-001	2-1240-001	2-1208-002	2-1208-010	2-1208-025
4Flow®	2-5011-005	2-5012-001	2-5013-001	2-5014-001	2-5023-001	2-5024-001	2-5010-002	2-5010-010	2-5010-025
4Flow® high capacity (HC)	2-5031-005	2-5032-001	2-5033-001	2-5034-001	2-5027-001	2-5028-001	2-5030-002	2-5030-010	2-5030-025
Application	Gravity flow				FPLC / HPLC		Gravity flow / FPLC / HPLC

其他相關產品

Cat.	Product Name	Size
2-0204-050	Avidin	50 mg
2-0205-050	BioLock	50 ml
2-0205-250	BioLock	250 ml
2-1016-002	Biotin	2 g
2-1016-005	Biotin	5 g
2-1042-025	10x Buffer BXT	25 ml
2-1000-025	10x Buffer E	25 ml
2-1002-100	10x Buffer R	100 ml
2-1003-100	10x Buffer W	100 ml
2-1045-250	Buffer XT-R	250 ml
2-1000-002	Desthiobiotin	1 g
2-1000-005	Desthiobiotin	5 g
2-1006-005	GFP-Strep-tag control protein	500 µg
2-1007-105	GFP-Twin-Strep-tag® control protein	500 µg