CheKine™ Reactive Oxygen Species (ROS) Detection Fluorometric Assay Kit
(Cat. No. KTB1910)
產品介紹
活性氧（Reactive Oxygen Species，ROS）是氧正常代謝的天然副產物，在細胞訊號傳導和體內平衡中扮演重要角色。但是，在氧化壓力相關狀態下，ROS 水平可以大大增加。ROS 的累積會嚴重破壞細胞結構。氧化壓力在心血管疾病、糖尿病、骨質疏鬆症、中風、發炎性疾病、以及神經退化性疾病和癌症的研究中發揮重要的作用。ROS 檢測將有助於確定氧化壓力如何調節各種細胞內途徑。
本試劑盒檢測原理是螢光探針 DCFH-DA (二氯二氫螢光素-乙醯乙酸酯) 可自由透過活細胞膜進入細胞內，並被細胞內的酯酶水解，形成 DCFH。DCFH 無螢光且無法自由穿透細胞膜，其可被細胞內的活性氧（ROS）氧化生成有螢光的 DCF，利用螢光顯微鏡或流式細胞儀檢測活細胞內 DCF 的螢光訊號強度即可分析細胞活性氧的量。
產品特點
• 利用超靈敏的螢光探針DCFH-DA 進行活性氧ROS檢測
• 提供了詳細的操作步驟
• 適合流式細胞儀和螢光顯微鏡檢測活性氧水平
保存條件
收到試劑盒後，請置於-20°C避光保存，該試劑盒的有效期限為12個月。試劑盒組份的儲存條件，請參考datasheet。
注意事項
• 不同批次號碼、不同廠商之間的組分不要混用；否則，可能導致結果異常。
• 混合或複溶組件時，避免產生氣泡。
• 勤換移液器吸頭，避免各組分間的交叉污染。
• 實驗開始前，確保所有的組件及設備處於適當的溫度。
• 陽性對照H2O2一般使用濃度為100 μM （建議濃度50-200 μM，視細胞型而定） 。通常刺激後30 min-4 h可以觀察到顯著的活性氧水平升高。對於不同的細胞，活性氧陽性對照的效果可能有較大的差異。若在刺激後30 min內觀察不到活性氧的升高，可延長誘導時間或適當提高活性氧陽性對照的濃度。如果螢光訊號過強，可縮短誘導時間或適當降低活性氧陽性對照的濃度。
• 實驗過程中，若陰性對照細胞螢光也比較強，可以依照1:2000-1:5000 稀釋螢光探針DCFH-DA，使DCFH-DA的終濃度為 2-5 μM。探針裝載的時間可在15-60 min 內適當調整，盡量縮短讀片時的曝光時間，且試驗組、對照組曝光時間需保持一致。
• 活性氧陽性對照 (H2O2) 僅用於作為陽性對照的樣品，並非所有試驗組樣本中都需加入活性氧陽性對照。
• 探針裝載後，一定要洗淨未進入細胞內的探針，否則會導致背景較高。
• 盡量縮短探針裝載後到偵測所花費的時間（刺激時間除外），以減少各種可能的誤差。
產品規格
| Cat. No. | Product Name | Size |
| KTB1910 | CheKine™ Reactive Oxygen Species (ROS) Detection Fluorometric Assay Kit | 50T / 100T |
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